Para su realización el paciente debe ser sometido previamente a un procedimiento de endoscopia, que habitualmente se hace bajo sedación. En este, además de apreciar con ayuda de una cámara cómo está la mucosa del estómago, se pueden tomar biopsias. Lo recomendado por el sistema Sydney, un método estandarizado y empleado a nivel mundial para la clasificación de la gastritis y el reporte de los hallazgos de la endoscopia y las biopsias, en su versión actualizada en 1994, es tomar cinco fragmentos de tejido o biopsias, así: dos del antro, dos del cuerpo, y una de la incisura ^12,13.

Lo anterior, con el objetivo de aumentar la probabilidad de detectar el microorganismo y de captar oportunamente las lesiones premalignas ^12,13, pues a mayor cantidad de tejido visto al microscopio o sembrado en el cultivo, mayor probabilidad habrá de observar a H. pylori u obtener sus colonias.

• Examen histológico^1,3-6,11.

Este estudio, disponible en el laboratorio de patología anatómica del Hematológico, es el más importante entre los análisis a realizar a partir de las muestras obtenidas por métodos invasivos. Consiste en someter el tejido gástrico, que debe encontrarse en los frascos con formol tamponado entregado por el laboratorio, a una serie de procesos para conservar su estructura y colorearlo con las tinciones de hematoxilina-eosina, Giemsa y plata de Warthin-Starry, y en ocasiones, con coloraciones de inmunohistoquímica.

Una vez está listo su montaje, las láminas coloreadas son visualizadas en el microscopio de luz para determinar no solo si hay presencia o no de H. pylori en el tejido, sino de inflamación activa, cambios en la arquitectura tisular, en la forma y disposición de las células, entre otros, y finalmente concluir si hay o no infección, clasificar la gastritis e indicar si hay cambios asociados con lesiones premalignas o malignas.

• Prueba rápida de ureasa ^4,8.

Consiste en someter un trozo de una biopsia gástrica al contacto con un reactivo que contiene urea y, valiéndose de la presencia de la enzima ureasa del microorganismo en la muestra, apreciar un viraje de color en la urea que es producido por el cambio en el pH que se genera cuando la ureasa de H. pylori hidroliza la urea, en bicarbonato y amoníaco. Esta prueba, disponible en el laboratorio de patología anatómica del Hematológico, tiene la ventaja de que los resultados se obtienen rápidamente y se puede usar en el diagnóstico inicial, pero no para hacer seguimiento al tratamiento ya que sería necesaria realizar una nueva biopsia.

• Cultivo de Helicobacter pylori ^1,4,11,14.

Este método es considerado el estándar de oro para hacer el diagnóstico de la infección. La prueba se ofrece en pocos centros puesto que las características del microorganismo exigen el uso de medios de transporte y cultivo especiales, y procedimientos inusuales para el procesamiento, siembra de las muestras e incubación de los medios de cultivo, para finalmente llegar al punto de valor de esta prueba que es el aislamiento de la bacteria, con la posterior realización de las pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos.

En el Hematológico cultivamos directamente las biopsias de tejido gástrico tomadas por el endoscopista y dispuestas en el medio de transporte previamente entregado por el laboratorio. Lo ideal es que su procesamiento y siembra en los medios de cultivo se haga el mismo día que se toman las muestras. Posteriormente, se incuban en una atmósfera que contiene mayor humedad y CO2 de lo habitual, y se observan periódicamente, a la espera de observar a partir del quinto día, un pequeño rocío que indica que H. pylori está creciendo.

Finalmente, partiendo de las colonias del microorganismo que hayan crecido en el agar, se hacen las pruebas que confirman su identificación y susceptibilidad a los antimicrobianos (antibiograma), lo que habitualmente toma otros tres días. En este caso se reta a la bacteria contra cinco antibióticos: amoxicilina, claritromicina, metronidazol, levofloxacino y tetraciclina, con el objetivo de apreciar in vitro, si es sensible o resistente a estos agentes.

• Pruebas moleculares para la detección de H. pylori 

Las técnicas de biología molecular como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por su siglas en inglés) ofrecen grandes ventajas, pues tienen mayor sensibilidad que el cultivo para detectar e identificar en la muestra al microorganismo, al igual que algunos genes de resistencia, principalmente para macrólidos (como la claritromicina) y fluoroquinolonas (como el levofloxacino), y el resultado se obtiene en un solo día ^4,7,14,15.

Este tipo de pruebas pueden aplicarse directamente en los fragmentos de tejido (biopsias gástricas), en las colonias de la bacteria crecidas en el cultivo, incluso en muestras de heces ^1,4,8,11; sin embargo, en el país su disponibilidad es aún escasa en los laboratorios clínicos.

Las técnicas de PCR y otras como la NGS (secuenciación de nueva generación, por sus siglas en inglés) se emplean también para estudiar en determinados casos y poblaciones la presencia de genes y mutaciones asociadas con mayor virulencia del microorganismo y mayor gravedad de la infección. ^8,16